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梯度设置是什么意思

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问题更新日期:2024-05-02 23:59:43

问题描述

梯度设置是什么意思求高手给解答
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梯度设置,意思是指梯度PCR多半是为第一次使用某条引物,为了摸索最佳退火条件设定的。

拿到引物的时候,会得到建议的Tm值,两条引物不同,你可以换算出一个退火温度。但是这个退火温度不一定是最佳反应条件,所以可以设定退火的梯度,最常用的是10C,这样每一个反应是一个退火温度,最后电泳可以观察到,在哪一个退火温度下,PCR产物产量和特异性都有保证。这样后面就可以选这个温度进行试验。但是对于已经有最佳条件的引物,或是反应体系,是不需要做梯度PCR的。